En muchas clases de biología universitaria, se espera que los estudiantes sepan instintivamente cómo escribir un trabajo de investigación científico con el formateo y la organización adecuados. Pero escribir un trabajo de investigación científico no es algo que sepa. Así que esta es una guía breve sobre cómo escribir uno seguido de un artículo de muestra escrito por mí el semestre pasado para mi clase de introducción a la biología celular en el Instituto Politécnico Rensselaer (obtuve un 98% en él, por lo que debería ser una buena guía).
Formateo :
Los trabajos de investigación biológicos deben escribirse en Times New New Roman Font, tamaño 11 y un espacio de línea de 1.5. En la esquina superior derecha de cada página debe haber su apellido seguido del número de página. Se recomiendan los márgenes de página normales.
El título de su artículo debe ser audaz 14 veces la nueva fuente romana.
en la parte superior de la primera página debe ser el encabezado: su nombre, Departamento, escuela, dirección escrita en cursiva como el trabajo de investigación a continuación. El encabezado de cada sección debe escribirse en letras en negrita.
Resumen:
Esta es la sección más corta de su trabajo. Consiste en unas pocas oraciones que primero dan un entorno general sobre el tema que está investigando y luego describe brevemente los experimentos realizados, cuáles eran los métodos generales y qué conclusiones se llegaron. Es como el resumen de su trabajo y debe ser conciso y al punto para que alguien pueda tener una idea general de cómo sería todo el documento después de solo un minuto de lectura. Todas las descripciones del trabajo realizado deben escribirse en tiempo pasado. Los resultados también deben estar en tiempo pasado. Sin embargo, los hechos bien aceptados como “el cielo es azul” se pueden escribir en tiempo presente.
Introducción:
Nuevamente, dar una visión general general de el tema que está investigando. La introducción no debe exceder dos páginas. A diferencia del resumen, esta descripción general debería tener más de dos oraciones. En él debe incluir toda la información necesaria para comprender los resultados de su trabajo y por qué son significativos. Deje en claro por qué su experimento es significativo para la ciencia en su conjunto. Este sería un buen lugar para discutir investigaciones anteriores que se han realizado sobre su tema y experimentos relacionados. Al final de su introducción, incluye el diseño experimental, lo que está tratando de descubrir con su experimento y su hipótesis original.
Materiales y métodos:
Describe tu experimento de manera paso a paso. No use palabras como “yo” o “yo” para mantener un tono profesional. Sin embargo, tenga cuidado de no ser demasiado detallado. Por ejemplo, si hirvió el agua como parte de su experimento, no necesita mencionar que encendió un quemador Bunsen y luego esperó diez minutos para que hierva el agua. Deje de lado cosas como esta que serían evidentes para otro estudiante de biología que lee su artículo.
Resultados:
Documente sus resultados en formato gráfico o gráfico. Incluya subtítulos para cada figura que dan una descripción general de lo que cada figura está midiendo. En el texto, describa cada uno de sus resultados, señalando al lector a las observaciones que son más relevantes. Describa los resultados de los experimentos de control e incluya observaciones que no se presentan en una figura o tabla formal, si corresponde.
Discusión:
resume verbalmente los resultados de Tu experimento y lo que significan para el campo que estás investigando. Digamos si su hipótesis fue rechazada o aceptada. Utilizando información de fondo sobre biología que obtuvo de otros trabajos o artículos de investigación, encuentre razones científicas por las cuales sus resultados salieron de la manera que lo hicieron. Recomiende algunos otros trabajos de investigación para obtener información sobre antecedentes. Por último, señale algunas limitaciones o sus investigaciones y planes para futuros estudios, ya sea que realmente planee hacer estos estudios depende de usted.
Referencias:
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Esto es simplemente una lista de referencias que usó. Use muescas de línea colgante y un estilo de formato científico adecuado. Ordene sus fuentes alfabéticamente.
Documento de investigación de muestra:
Heidemarie Embrechts
Departamento de biología
Rensselaer Polytechnic Institute
Troy, NY 12180
cloramphenicol prematuramente Deleja la proliferación Escherichia coli a través de la inhibición de la síntesis de proteínas
abstract . Escherichia coli es una bacteria gram negativa que se encuentra en los intestinos de la mayoría de los animales de sangre cálida. Presumimos que debido a que el antibiótico inhibe la síntesis de proteínas, su adición a un cultivo e coli causaría que el crecimiento sea arrestado. Para confirmar el efecto del cloranfenicol en el crecimiento e coli , comparamos el aumento en la concentración celular de dos cultivos de e coli durante un período de tiempo de cuatro horas. Una de las culturas fue tratada con cloranfenicol después de la primera hora. La concentración de la e coli en la cultura con cloranfenicol pronto dejó de aumentar y después de tres horas y media comenzó a disminuir ligeramente. En contraste, las bacterias no tratadas experimentaron un crecimiento logarítmico continuo. De estos resultados, concluimos que el cloranfenicol inhibe la síntesis de proteínas en e coli y actúa como un inhibidor efectivo del crecimiento.
Introducción. Este estudio documentó El efecto del cloranfenicol sobre el crecimiento celular e coli . El cloranfenicol es un antibiótico utilizado en los países del tercer mundo para tratar las infecciones derivadas de las bacterias Gram positivas y Gram negativas. Trata las infecciones uniéndose a la subunidad 50S de un ribosoma bacteriano, bloqueando así el sitio que acepta el ARNt del complejo de ARNm y deteniendo efectivamente la transpeptidación (cloranfenicol). En última instancia, el cloranfenicol bloquea el crecimiento bacteriano al deshabilitar la formación de enlaces péptidos entre los aminoácidos. El cloranfenicol tiene este efecto sobre las bacterias cuando está presente en concentraciones entre 1 y 10 µg/ml. Sin embargo, en cepas de bacterias resistentes, puede tomar hasta 1000ug/ml para que el cloranfenicol tenga un efecto. Innumerables estudios, incluido uno realizado por Cavalli y MacCaro, ya han demostrado que detiene el crecimiento en e coli al inhibir la síntesis de proteínas (Brock 35). El objetivo de nuestro estudio fue confirmar una vez más de forma independiente este fenómeno.
cuando no se tratan con antibióticos y los cultivos no perturbados, e coli tienden a crecer de manera predecible y logarítmica. Se someten a cuatro etapas principales de crecimiento: una fase de ampliación, una fase de multiplicación logarítmica, una fase estacionaria y una fase de muerte logarítmica (EDICK). Estas fases también se conocen comúnmente como Fase I, II, III, IV respectivamente. La fase I es un momento de síntesis de proteínas y crecimiento celular y durante el cual no hay división. El ADN se transcribe primero en ARN. Luego, las moléculas de ARNm comienzan la traducción al unirse a los ribosomas. Mientras tanto, las moléculas de ARNt con bases complementarias a las de los ARNm unidos por ribosomas se dispersan en el citoplasma. A medida que las moléculas de ARNt individuales unen su secuencia de ARNm en el ribosoma, cada uno trae consigo un aminoácido que luego se agrega a la cadena de polipéptidos en crecimiento a través de la formación de enlaces péptidos. Luego, otra molécula de ARNt se une al siguiente codón correspondiente y el proceso continúa repitiéndose hasta que se haya formado una proteína completa (Reece). Al inhibir la formación de enlaces de péptidos al unirse a la subunidad 50S del cloranfenicol ribosoma, lleva este proceso a una parada y detiene la síntesis de proteínas. Cuando se ha formado un número crítico de proteínas de esta manera, los cultivos e coli ingresan a la fase de crecimiento II, la fase de la multiplicación logarítmica. Durante esta fase, las bacterias sufren fisión binaria asexual. El crecimiento es rápido al principio, mientras que todavía hay un suministro ilimitado de nutrientes y los productos de desecho aún no han comenzado a acumularse. A medida que los productos de desecho se acumulan y el suministro de nutrientes comienza a usarse, el crecimiento neto se detiene a medida que la muerte celular se vuelve igual a la formación de células. Esta fase estacionaria generalmente dura un período prolongado de tiempo hasta que finalmente el suministro de nutrientes cae por debajo de un punto crítico. Luego, la cultura entra en una etapa de muerte logarítmica que es el polo opuesto de la etapa dos. El número de células vivas en el cultivo disminuye lentamente al principio, pero luego la velocidad a medida que más y más células se vuelven incapaces de lidiar con la concentración de nutrientes a su alrededor (Edick). Al interferir con la fase uno de la curva de crecimiento e coli , el cloranfenicol hace que las bacterias exhiban una curva de crecimiento que difiere de este patrón estándar.
Materiales y métodos.
Materiales
Los dos cultivos e coli se cultivaron un caldo compuesto principalmente de corazón de carne y gelatina tratada. Se añadió una pequeña cantidad de e coli a este medio para comenzar el crecimiento de la cultura principal. El matraz que contiene el caldo fue sacudido y almacenado a 37 grados Celsius durante 20 horas hasta que se convirtió en una cultura estacionaria. Unas horas antes del inicio del experimento, la cultura Ecoli se usó para crear las dos culturas utilizadas más tarde en el experimento. Luego se agregó un mililitro de etanol tanto al cloranfenicol como al cultivo de control.
ensayo de crecimiento
Los cultivos se dejaron para crecer a 37 grados Celsius . Cada treinta minutos durante un período de tiempo de cuatro horas, se leyeron muestras de cultivo utilizando un espectrofotómetro que había estado en blanco y establecido en una longitud de onda de 600 nm. Después de una hora, se disolvió una cantidad apropiada de cloranfenicol para dar una concentración antibiótica final de 200 µg/ml en etanol y luego se agregó al cultivo. Estos O.D. Los valores se convirtieron a valores de densidad celular utilizando el conocimiento de que OD1.000 = 1 x 106 celdas/ml. Las curvas de crecimiento resultantes donde se documentan. /B> Enumera todas las concentraciones e coli recolectadas en células por mililitro. La tabla también incluye la diferencia en la concentración celular entre los dos cultivos en cualquier momento para acentuar el contraste con el tiempo.
Figura I- compara el número de células por Mililitro de la cultura experimental tratada con la del control. La lectura de OD se llevó durante un período de tiempo de cuatro horas se gráficamente y se tomaron lecturas cada treinta minutos. Las concentraciones en este gráfico se derivaron de las lecturas de OD y la fórmula OD 600 1.000 = 1 x 10 6 Cells/ml.
<bosque Discusión . El cloranfenicol tuvo un efecto fácilmente reconocido en la concentración celular e coli , lo que provocó que el crecimiento celular se desvíe de la curva de crecimiento estándar después de treinta minutos y alcance prematuramente una fase estacionaria. Durante la última media hora del experimento, la concentración celular medida en el cultivo tratada con cloranfenicol incluso disminuyó en 2.5 x 10 4 células por ml a medida que el cultivo entró prematuramente en la célula de la muerte logarítmica. En contraste, el cultivo de control exhibió un crecimiento logarítmico y no parecía alcanzar la fase estacionaria hasta las tres horas y media después del experimento. En ningún momento la concentración celular medida realmente disminuyó. Como se indicó anteriormente, la concentración e coli probablemente dejó de aumentar después de la adición de cloranfenicol debido a su papel en la inhibición de la síntesis de proteínas. La síntesis de proteínas es una parte indispensable del ciclo celular sin el cual las células no pueden replicarse. Esto es especialmente cierto durante la replicación del ADN para la cual son necesarias proteínas como primasa, helicasa, topoisomerasa y polimerasa (Becker y Kleinsmith y Hardin, 2006). Es importante tener en cuenta que el cultivo de control no tratado con cloranfenicol no exhibió un crecimiento exponencial ideal. Esta tendencia se debió al hecho de que el e coli no tenía condiciones de crecimiento ideales para comenzar debido a limitaciones en la concentración de nutrientes y el espacio de crecimiento.
según nuestros datos , hubo un lapso de tiempo de treinta minutos entre la adición de cloranfenicol a la cultura experimental y el comienzo de la fase estacionaria. De hecho, durante este intervalo de treinta minutos no hubo una diferencia apreciable en el crecimiento celular entre los cultivos experimentales y de control. Una posible explicación puede ser que no todo el crecimiento intercelular requiere síntesis de proteínas per se, ya que gran parte implica el crecimiento continuo de las proteínas existentes (Ben-Shaul). Así, cuando las células se trataron inicialmente con cloranfenicol, los valores de OD continuaron aumentando como resultado del crecimiento de las cadenas de proteínas preexistentes. Sin embargo, cuando estas células alcanzaron su tamaño máximo y comenzaron a prepararse para la división, la progresión a través del ciclo celular se evitó por la falta de síntesis de proteínas y luego las concentraciones de proteínas comenzaron a estabilizarse. Otra posible explicación es la acumulación de nucleótidos libres en los citoplasmas de las células e coli . Según estudios anteriores, los núcleos de bacterias e coli tratadas con concentraciones sub-letales de cloranfenicol crecieron progresivamente en el tiempo con el tiempo. Cuando se colocan en un medio fresco, las bacterias se reanudaron con la división celular y sus núcleos se redujeron a la normalidad. Este aumento se atribuyó a un aumento en el número de nucleótidos libres. Este aumento se hipotetizó que resulta del hecho de que el cloranfenicol bloquea la incorporación de aminoácidos libres en complejos grandes, pero no inhibe su formación per se (Brock 38).
La causa de la disminución en las concentraciones de proteínas medidas para la cultura experimental después de tres horas y media también es discutible. En términos generales, los espectrofotómetros no diferencian entre células vivas y muertas. Debido a que miden las concentraciones de proteínas, cualquier efecto en la condición celular debe dejar el valor de OD sin cambios (EDICK). Por lo tanto, la aceleración en la muerte celular que acompaña naturalmente al inicio de la fase IV no debería haber resultado en una disminución en las lecturas de OD (la base de los valores de concentración celular utilizados en este experimento). Incluso el daño celular causado por cloranfenicol no debería haber causado esta anomalía. Sin embargo, estudios anteriores han demostrado que las células que crecen en concentraciones sub-letales de cloranfenicol tienden a exhibir formas anormales en forma de barra o formas L a medida que sus proteínas se agrupan más cerca (Brock 38). Al hacer que las células se encofren, esta agrupación podría haber sido responsable de la caída en las lecturas de OD.
Otra explicación podría ser la lisis celular. Al inhibir la síntesis de proteínas en las células E coli, el cloranfenicol detiene efectivamente la formación de lisosomas nuevos. Por lo tanto, las células E coli tratadas ya no pueden digerir productos de desecho que en su lugar se acumulan en las células. Como resultado, la ósmosis hace que las moléculas de agua fluyan que ingresan a la célula, eventualmente, lo que hace que la célula se vuelva hipotónica. Las membranas celulares explotan. Estas células lisadas no se pueden detectar con un espectrofotómetro y, por lo tanto, parecen “desaparecer”. Así, la concentración celular medida disminuye. También se ha demostrado que el cloranfenicol descompone los ribosomas de bacterias tratados con él durante un período prolongado de tiempo. Esto también podría ser responsable de la disminución de los valores de OD (Gupta, 1975).
Muchas preguntas aún permanecen respondidas por nuestro experimento incluso después de que el papel de cloranfenicol en la inhibición del crecimiento celular se ha mostrado claramente. Por un lado, solo probamos el efecto del cloranfenicol en una concentración de e coli todavía no está claro si una concentración e coli óptima para el crecimiento contrarrestaría las propiedades inhibidoras de cloranfenicol . Además, estudios anteriores han demostrado que las bacterias tienden a ser más susceptibles al cloranfenicol cuando se cultivan en una temperatura superior a 37 grados Celsius (Brock). Se podría hacer una experimentación adicional para determinar si esta mayor sensibilidad implicaría un retraso de tiempo más corto entre el tratamiento con cloranfenicol y el inicio de la fase estacionaria o si implicaría una disminución anterior y más pronunciada en los valores de OD medidos o alguna combinación de ambos escenarios. El experimento también podría repetirse con PHS variables para ver si la capacidad de cloranfenicol de unirse a la subunidad de ARN de los años 50 se ve afectada en ciertos niveles de acidez. Nuestro estudio también fue limitado, ya que solo medimos la concentración durante cuatro horas. El efecto total del cloranfenicol en la descomposición logarítmica habría sido una adición interesante. En resumen, nuestro estudio tuvo éxito en el sentido de que demostró de manera concluyente que el crecimiento celular de cloranfenicol limita, pero aún podría ampliarse para obtener una comprensión más matizada de su efecto en el ciclo celular e coli
Referencias .
Becker, Kleinsmith, Hardin. (2006), el mundo de la célula. CH 18; Pearson Education.
Ben-Shaul, Y. (1969), Efecto del cloranfenicol sobre el crecimiento, la distribución del tamaño, la síntesis de clorofila y la ultraestructura de Euglena gracilis, 627-644: Universidad de Tel Aviv. Consultado el 15 de Mary 2008.
Brock, T. (1996), Cloranfenicol, 32-39: Universidad de Indiana. Consultado el 19 de mayo de 2008.
“cloranfenicol”. Enciclopedia Brittanica en línea. Premier de búsqueda académica. EBSCO. Rensselaer, Troy. 13 de marzo de 2008.
Edick, G. (2008), Una introducción a los métodos de investigación en Biología Celular y Molecular, P 64: Departamento de Biología Rensselaer Polytechnic Institute.
Gupta, R . (1975), Matado y lisis de Escherichia coli en presencia de cloranfenicol: relación con el magnesio celular, 748-749: Sociedad Americana de Microbiología. Consultado el 19 de marzo de 2007.
